Quels gants à usage unique devez-vous porter lors de l'extraction d'ARN avec TRIzol® ?
L'ARN joue un rôle crucial dans l'expression des gènes, servant d'intermédiaire entre l'ADN et les protéines. L'extraction d'ADN, d'ARN et de protéines est une étape clé de l'étude de la génétique moléculaire. Le port d'équipements de protection individuelle (EPI) adaptés lors de l'extraction d'ARN est essentiel pour éviter toute contamination par la RNase, qui pourrait fausser les résultats. De plus, les méthodes d'extraction nécessitent souvent l'utilisation de solvants organiques. Selon la méthode d'extraction utilisée, le choix de gants de laboratoire appropriés est primordial, notamment des gants offrant une résistance optimale aux produits chimiques manipulés. C'est pourquoi il est si important de choisir avec soin les gants à usage unique que vous portez lors de l'extraction d'ARN avec TRIzol® ou des réactifs similaires.
Quelle est la méthode d'extraction d'ARN la plus utilisée ?
La méthode d'extraction au thiocyanate de guanidinium-phénol-chloroforme est largement utilisée en biologie moléculaire pour isoler l'ARN (et occasionnellement l'ADN et les protéines) à partir de divers échantillons (tissus humains/animaux ; plantes ; levures ; bactéries).
Depuis la publication de la méthode de Chomczynski-Sacchi en 1987 (Source : Chomczynski – Sacchi – 1987. « Méthode en une étape d’isolement de l’ARN par extraction au thiocyanate de guanidinium acide-phénol-chloroforme ». https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ), cette méthode est devenue la méthode de référence. Bien que de nombreuses méthodes alternatives existent aujourd’hui, comme les kits d’extraction, beaucoup d’utilisateurs privilégient encore cette méthode manuelle.
Plusieurs sociétés commercialisent des réactifs pour ce processus d'extraction sous différents noms commerciaux, tels que TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx), et autres.
Le protocole d'extraction au thiocyanate de guanidinium-phénol-chloroforme permet la dissolution simultanée des protéines, des lipides et des acides nucléiques tout en préservant l'intégrité de l'ARN. Le principal avantage de cette méthode réside dans sa capacité à isoler simultanément l'ARN, l'ADN et les protéines d'un même échantillon par simple ajustement de la phase d'extraction. Cependant, la principale difficulté réside dans la manipulation des réactifs toxiques et volatils utilisés.
Quels sont les risques liés aux réactifs utilisés pour l'extraction d'ARN ?
Dans cet article, nous faisons spécifiquement référence à « TRIzol® » — la solution commerciale utilisée dans nos tests de résistance chimique sur les gants de laboratoire (perméation chimique).
Tous ces réactifs sont constitués d'un mélange de phénol (solvant) et de thiocyanate de guanidinium (agent chaotrope).
Ces réactifs portent divers avertissements et symboles de danger conformément au règlement (CE) n° 1272/2008 relatif à la « classification, à l’étiquetage et à l’emballage » (règlement CLP) des substances et des mélanges :
La composition de ces réactifs comprend :
- Phénol: Composé très corrosif pour la peau et les yeux, toxique par inhalation, ingestion et contact cutané. Il peut provoquer des brûlures et des blessures graves.
- Thiocyanate de guanidinium: Corrosif pour la peau et les yeux, toxique par inhalation, ingestion et contact cutané, et peut provoquer des irritations et des brûlures.
Lors de la manipulation de ces réactifs sous une hotte aspirante afin d'éviter l'exposition aux vapeurs toxiques, les utilisateurs sont exposés à des risques chimiques, notamment par contact cutané.
Les opérateurs de laboratoire manipulent généralement les emballages commerciaux (100 à 200 ml), ce qui comporte un risque de déversement accidentel. Lors du traitement des échantillons, ils sont également exposés au TRIzol® (micropipetage, agitation des échantillons au vortex, ouverture/fermeture des microtubes, broyage des échantillons, etc.).
Il est donc crucial de veiller à l'utilisation d'équipements de protection individuelle (EPI) appropriés, tels que de laboratoire , lors de la manipulation de ces produits chimiques..
Quels gants jetables conviennent à la manipulation des réactifs d'extraction d'ARN ?
Compte tenu des produits chimiques utilisés, le port de gants jetables adaptés est primordial. Les opérateurs doivent vérifier si les gants qu'ils utilisent habituellement pour ces tâches conviennent à la manipulation de ces réactifs.
Il convient de privilégier les gants à usage unique en nitrile ou en nitrile/néoprène plutôt que les gants en latex de caoutchouc naturel. Les gants en nitrile sont en effet plus résistants aux solvants organiques.
Les SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 et SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300, et ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 sont particulièrement adaptés à la protection contre les éclaboussures lors de la manipulation de réactifs d'extraction d'ARN.
Les tests de perméation chimique avec TRIzol® sur ces gants ont donné les résultats suivants :
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minutes
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300 : 100 minutes
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minutes
Pour une utilisation dans les laboratoires de biologie moléculaire, nous recommandons le ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250, qui semble offrir le meilleur équilibre entre protection et coût.
Les SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260et ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 sont tous fabriqués grâce à twinSHIELD™ la technologie. Cette technique de double trempage permet de créer un gant double couche. Grâce à twinSHIELD™ , ces gants atteignent un qualité acceptable (AQL) de 0,25, le plus haut niveau de protection disponible sur le marché, garantissant ainsi une sécurité optimale pour l'opérateur. Pour en savoir plus sur l'importance de l'AQL des gants de laboratoire, prenez quelques minutes pour consulter notre article dédié.
Ne prenez aucun risque lors de vos extractions d'ARN : portez des gants adaptés à la manipulation de réactifs. Consultez notre guide de sélection des gants et notre guide de résistance chimique ou contactez votre SHIELD Scientific représentant commercial pour faire le meilleur choix.
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