Vilka engångshandskar bör man bära vid RNA-extraktion med TRIzol®?
RNA spelar en avgörande roll i genuttryck och fungerar som mellanhand mellan DNA och proteiner. Extraktionen av DNA, RNA och proteiner är ett viktigt steg i studier av molekylärgenetik. Att bära lämplig personlig skyddsutrustning (PPE) under RNA-extraktion är viktigt för att undvika kontaminering med RNase, vilket kan snedvrida resultaten. Dessutom kräver extraktionsmetoder ofta användning av organiska lösningsmedel. Beroende på vilken extraktionsmetod som används att välja rätt laboratoriehandskar , särskilt handskar som erbjuder bästa möjliga motståndskraft mot de kemikalier som hanteras. Det är därför det är så viktigt att noggrant välja de engångshandskar du bär under RNA-extraktion med TRIzol® eller liknande reagens.
Vilken är den mest använda RNA-extraktionsmetoden?
Guanidiniumtiocyanat-fenol-kloroform-extraktionsmetoden används ofta inom molekylärbiologi för att isolera RNA (och ibland DNA och proteiner) från olika prover (mänskliga/djuriska vävnader; växter; jäst; bakterier).
Sedan publiceringen av Chomczynski-Sacchi-metoden från 1987 (Källa: Chomczynski – Sacchi – 1987. “Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.” https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ) har detta blivit referensmetoden. Även om det finns många alternativa metoder idag, såsom extraktionskit, föredrar många användare fortfarande denna manuella metod.
Flera företag marknadsför reagens för denna extraktionsprocess under olika kommersiella namn, såsom TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx) och andra.
Guanidiniumtiocyanat-fenol-kloroform-extraktionsprotokollet möjliggör samtidig upplösning av proteiner, lipider och nukleinsyror samtidigt som RNA:ts integritet bibehålls. Den främsta fördelen med denna metod är dess förmåga att samtidigt isolera RNA, DNA och proteiner från samma prov genom att helt enkelt justera återhämtningsfasen. Den största utmaningen ligger dock i att hantera de toxiska och flyktiga reagenser som är involverade i processen.
Vilka är riskerna med de reagenser som används för RNA-extraktion?
I den här artikeln hänvisar vi specifikt till "TRIzol®" – den kommersiella lösningen som används i våra kemiska resistenstester på laboratoriehandskar (kemisk permeation).
Alla dessa reagens består av en blandning av fenol (lösningsmedel) och guanidiniumtiocyanat (kaotropiskt medel).
Dessa reagenser är försedda med olika varningssignaler och symboler enligt förordning (EG) nr 1272/2008 om klassificering, märkning och förpackning (CLP-förordningen) av ämnen och blandningar:
Sammansättningen av dessa reagenser inkluderar:
- Fenol: En mycket frätande förening för hud och ögon, giftig vid inandning, förtäring och hudkontakt. Kan orsaka allvarliga brännskador och skador.
- Guanidiniumtiocyanat: Frätande för hud och ögon, giftigt vid inandning, förtäring och hudkontakt, och kan orsaka irritation och brännskador.
Vid hantering av dessa reagenser under dragskåp för att undvika exponering för giftiga ångor utsätts användare för kemiska risker, särskilt genom hudkontakt.
Labboperatörer hanterar vanligtvis kommersiella förpackningar (100–200 ml), vilket innebär att det finns risk för oavsiktligt spill. Under provbearbetningsfasen exponeras operatörerna också för TRIzol® (mikropipettering, virvling av prover, öppning/stängning av mikrorör, provmalning etc.).
Därför är det avgörande att säkerställa användning av lämplig personlig skyddsutrustning (PPE), såsom laboratoriehandskar , vid hantering av dessa kemikalier..
Vilka engångshandskar är lämpliga för hantering av RNA-extraktionsreagenser?
Med tanke på de kemikalier som är inblandade är det av yttersta vikt att använda lämpliga engångshandskar. Operatörer bör bedöma om de handskar de vanligtvis använder för dessa uppgifter är lämpliga för hantering av dessa reagenser.
Prioritet bör ges till engångshandskar av nitril eller nitril/neopren framför handskar av naturgummilatex. Nitrilhandskar är mer resistenta mot organiska lösningsmedel.
SHIELDskin SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 och SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300samt ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 är särskilt väl lämpade för skydd mot stänk vid hantering av RNA-extraktionsreagenser.
De kemiska permeationstesterna med TRIzol® på dessa handskar gav följande resultat:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minuter
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300: 100 minuter
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minuter
För användning i molekylärbiologiska laboratorier rekommenderar vi ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250, som verkar erbjuda den bästa balansen mellan skydd och kostnad.
SHIELDskin SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260och ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 handskar är alla tillverkade med twinSHIELD™ -teknik. Denna dubbeldoppningsteknik skapar en handske med dubbla lager. Tack vare twinSHIELD™ -tekniken uppnår dessa handskar en AQL på 0,25, den högsta skyddsnivån på marknaden, vilket ger bättre operatörssäkerhet. För att lära dig mer om vikten av AQL för laboratoriehandskar, ta några minuter för att läsa vår dedikerade artikel.
Ta inga risker under dina RNA-extraktioner – använd handskar som är lämpliga för hantering av reagenser. Se vår handskguide och kemikalieresistensguide eller kontakta din SHIELD Scientific säljare för att fatta ett välgrundat beslut.
Dela denna intressanta information
