Welche Einweghandschuhe sollten Sie bei der RNA-Extraktion mit TRIzol® tragen?
RNA spielt eine entscheidende Rolle bei der Genexpression und dient als Bindeglied zwischen DNA und Proteinen. Die Extraktion von DNA, RNA und Proteinen ist ein wichtiger Schritt in der molekulargenetischen Forschung. Das Tragen geeigneter persönlicher Schutzausrüstung (PSA) während der RNA-Extraktion ist unerlässlich, um eine Kontamination mit RNase zu vermeiden, die die Ergebnisse verfälschen könnte. Darüber hinaus erfordern Extraktionsmethoden häufig den Einsatz organischer Lösungsmittel. Je nach verwendeter Extraktionsmethode die Auswahl der richtigen labor . entscheidend, insbesondere solcher, die eine optimale Beständigkeit gegenüber den verwendeten Chemikalien bieten. Daher ist es so wichtig, die Einweghandschuhe, die Sie bei der RNA-Extraktion mit TRIzol® oder ähnlichen Reagenzien tragen, sorgfältig auszuwählen
Welche RNA-Extraktionsmethode wird am häufigsten verwendet?
Die Guanidiniumthiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktionsmethode wird in der Molekularbiologie häufig zur Isolierung von RNA (und gelegentlich DNA und Proteinen) aus verschiedenen Proben (menschliches/tierisches Gewebe; Pflanzen; Hefen; Bakterien) verwendet.
Seit der Veröffentlichung der Chomczynski-Sacchi-Methode im Jahr 1987 (Quelle: Chomczynski – Sacchi – 1987. „Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.“ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ) gilt diese als Referenzmethode. Obwohl heute zahlreiche alternative Methoden, wie beispielsweise Extraktionskits, existieren, bevorzugen viele Anwender nach wie vor diese manuelle Methode.
Mehrere Unternehmen vermarkten Reagenzien für diesen Extraktionsprozess unter verschiedenen Handelsnamen, wie z. B. TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx) und andere.
Das Guanidiniumthiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktionsverfahren ermöglicht die gleichzeitige Auflösung von Proteinen, Lipiden und Nukleinsäuren unter Erhalt der RNA-Integrität. Der Hauptvorteil dieser Methode liegt in der Möglichkeit, RNA, DNA und Proteine aus derselben Probe durch einfache Anpassung der Extraktionsphase zu isolieren. Die größte Herausforderung besteht jedoch im Umgang mit den toxischen und flüchtigen Reagenzien.
Welche Gefahren bergen die für die RNA-Extraktion verwendeten Reagenzien?
In diesem Artikel beziehen wir uns speziell auf „TRIzol®“ – die kommerzielle Lösung, die wir bei unseren Chemikalienbeständigkeitstests an labor (Chemikalienpermeation) verwendet haben.
Alle diese Reagenzien bestehen aus einer Mischung aus Phenol (Lösungsmittel) und Guanidiniumthiocyanat (chaotropes Mittel).
Diese Reagenzien tragen verschiedene Gefahrenhinweise und Symbole gemäß der Verordnung (EG) Nr. 1272/2008 über die „Einstufung, Kennzeichnung und Verpackung“ (CLP-Verordnung) von Stoffen und Gemischen:
Die Zusammensetzung dieser Reagenzien umfasst:
- Phenol: Eine stark ätzende Verbindung für Haut und Augen, giftig beim Einatmen, Verschlucken und Hautkontakt. Es kann schwere Verätzungen und Verletzungen verursachen.
- Guanidiniumthiocyanat: Ätzend für Haut und Augen, giftig beim Einatmen, Verschlucken und Hautkontakt; kann Reizungen und Verätzungen verursachen.
Beim Umgang mit diesen Reagenzien unter einem Abzug, um die Exposition gegenüber giftigen Dämpfen zu vermeiden, sind die Anwender chemischen Risiken, insbesondere durch Hautkontakt.
Die Laborangestellten handhaben üblicherweise die kommerziellen Verpackungen (100–200 ml), wobei die Gefahr eines versehentlichen Verschüttens. Während der Probenverarbeitung kommen die Angestellten außerdem mit TRIzol® in Kontakt (Mikropipettieren, Vortexen der Proben, Öffnen/Schließen von Mikrozentrifugenröhrchen, Zerkleinern der Proben usw.).
Daher ist es unerlässlich, beim Umgang mit diesen Chemikalien die Verwendung geeigneter persönlicher Schutzausrüstung (PSA), wie z. B. labor , sicherzustellen.
Welche Einweghandschuhe eignen sich für den Umgang mit RNA-Extraktionsreagenzien?
Angesichts der verwendeten Chemikalien ist das Tragen geeigneter Einweghandschuhe von größter Wichtigkeit. Die Anwender sollten prüfen, ob die Handschuhe, die sie üblicherweise für diese Tätigkeiten verwenden, für den Umgang mit diesen Reagenzien geeignet sind.
Einweghandschuhen aus Nitril oder Nitril/Neopren sollte Vorrang vor Naturkautschuklatexhandschuhen eingeräumt werden. Nitrilhandschuhe sind tatsächlich beständiger gegenüber organischen Lösungsmitteln.
Die SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 und SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300sowie ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 eignen sich besonders gut zum Schutz vor Spritzern beim Umgang mit RNA-Extraktionsreagenzien.
Die chemischen Permeationstests mit TRIzol® an diesen Handschuhen ergaben folgende Ergebnisse:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 Minuten
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300: 100 Minuten
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 Minuten
Für den Einsatz in molekularbiologischen Laboren empfehlen wir den ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 Handschuh, der das beste Verhältnis zwischen Schutz und Kosten zu bieten scheint.
Die SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260und ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 werden alle mit twinSHIELD™ -Technologie. Dieses Doppeltauchverfahren erzeugt einen zweilagigen Handschuh. Dank der twinSHIELD™ -Technologie erreichen diese Handschuhe einen AQL-Wert von 0,25– den höchsten Schutzstandard auf dem Markt – und sorgen so für mehr Sicherheit beim Tragen. Um mehr über die Bedeutung des AQL-Werts von labor , lesen Sie unseren entsprechenden Artikel.
Gehen Sie bei der RNA-Extraktion kein Risiko ein – tragen Sie geeignete Handschuhe für den Umgang mit Reagenzien. Nutzen Sie unsere Handschuh-Auswahlhilfe und unseren Leitfaden zur Chemikalienbeständigkeit oder wenden Sie sich an Ihren SHIELD Scientific Vertriebsmitarbeiter, um die richtige Wahl zu treffen.
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