Tillbaka

Lär dig om handskar

KONTROLL AV ENDOTOXINKONTAMINERING PÅ STERILA RENRUMSHANDSKER

Injicerbara läkemedel eller implanterbara medicintekniska produkter som är kontaminerade med endotoxiner kan orsaka en mycket allvarlig patientreaktion.

Endotoxinkontaminering av batcher av injicerbara lösningar eller implantat kan också få betydande ekonomiska konsekvenser för tillverkaren.

Därför är övervakning av endotoxinkontaminering på sterila nitrilhandskar och latexhandskar för renrum en viktig fråga för kritiska miljöer, inklusive industrin för implanterbara medicintekniska produkter och läkemedelsindustrin.

Vad är bakteriella endotoxiner och deras inverkan?

Vad är bakteriella endotoxiner?

Endotoxiner, även kända som lipopolysackarider (LPS), är komponenter i det yttre membranet hos gramnegativa bakterier. Exempel på gramnegativa bakterier inkluderar E. coli, Salmonella, Legionella och Neisseria.

Figur 1 – Cellvägg hos grampositiva och gramnegativa bakterier

Gramnegativa bakterier är vanligt förekommande i miljön, inklusive i vattensystem och matsmältningskanalen. Endotoxiner kan frigöras när dessa bakterier bryts ner eller lyseras och kan finnas kvar även när bakterierna själva inte längre är livskraftiga.

Vilka är konsekvenserna av endotoxinkontaminering?

Bakteriella endotoxiner kan aktivera människors och djurs immunförsvar och utlösa en inflammatorisk reaktion. Beroende på exponeringsnivån kan denna reaktion variera från feber till mer allvarliga systemiska reaktioner.

Feber är en av de karakteristiska reaktionerna på endotoxinexponering. Det är därför bakteriella endotoxiner klassificeras som pyrogener, ämnen som kan orsaka en höjning av kroppstemperaturen.

När endotoxiner kommer in i blodomloppet kan höga exponeringsnivåer utlösa allvarliga systemiska inflammatoriska reaktioner. Det är därför endotoxinkontroll är särskilt viktig för injicerbara läkemedel och andra produkter avsedda att komma i kontakt med blodomloppet.

I kritiska miljöer, som inom läkemedelsindustrin, är endotoxinövervakning avgörande. Detta är särskilt viktigt vid produktion av vatten av farmaceutisk kvalitet, parenterala och injicerbara läkemedel, inklusive infusions- och dialysvätskor, samt implanterbara medicintekniska produkter.

Minska endotoxinnivåerna på renrumshandskar

Endotoxiner är kända för att vara den vanligaste källan till pyrogener i läkemedel och medicintekniska produkter.

Endotoxiner är membranrester från gramnegativa bakterier, vilka är vanligt förekommande i miljön. Dessutom är endotoxiner mycket resistenta mot desinfektions- eller steriliseringsprocesser, inklusive gammabestrålning.

Därför bör den biologiska belastningen från nitril- och latexhandskar begränsas så mycket som möjligt före sterilisering.

Biologisk belastning är populationen av livskraftiga mikroorganismer som finns på eller i en produkt. Potentiella källor till biologisk belastning under handsktillverkning inkluderar:

• Råvaror och processvatten som används under tillverkningen.
• Operatörer involverade i tillverkningsprocessen.
• Rengöring och förpackning av handskar.

Den biologiska belastningen på SHIELD Scientific sterila handskar testas av ett oberoende externt laboratorium i enlighet med ISO 11737-1 som en del av SHIELD Scientific kvalitetskontrollprocess.

För kritiska tillämpningar kan därför både sterilitet och endotoxinkontroll behöva beaktas vid val av material och skyddsutrustning som kan bidra till produktkontaminering.

Sterilitet: För strålsteriliserade handskar måste steriliseringsprocessen valideras för att uppnå den specificerade sterilitetsnivån (SAL). ISO 11137-2 definierar metoder för att fastställa den steriliseringsdos som krävs för att uppnå en SAL på 10⁻⁶.

Figur 2 – SHIELDskin XTREME™ sterila handskar PE-påse med steriliseringsindikator

Endotoxinkontroll: Sterilisering och endotoxinkontroll är inte samma sak. Sterilisering är avsedd att kontrollera livskraftiga mikroorganismer, medan bakteriella endotoxiner kan finnas kvar även efter att mikroorganismerna inte längre är livskraftiga. Därför är det viktigt att kontrollera biobördan och endotoxinnivåerna under hela handsktillverkningsprocessen, bland annat genom lämplig tvätt och renlighetskontroller före sterilisering.

Varför är det viktigt att kontrollera endotoxinnivåerna på sterila renrumshandskar?

Sterilitet och låga endotoxinnivåer är två olika aspekter av kontamineringskontroll. En steril handske har genomgått en validerad steriliseringsprocess för att kontrollera livskraftiga mikroorganismer, men detta garanterar inte nödvändigtvis en låg endotoxinnivå.

För läkemedelstillverkare och tillverkare av implanterbara medicintekniska produkter bör endotoxinkontaminering därför beaktas genom hela produktionsprocessen, från råmaterial till färdiga produkter, inklusive skyddsutrustning som bärs av renrumsoperatörer.

Den handskförsedda handen kan vara i direkt kontakt med injicerbara lösningar eller deras behållare och implanterbara medicintekniska produkter. Handskar är därför potentiellt en källa till kontaminering.

Figur 3 – Operatören byter nål på en fyllningsmaskin med två par (dubbla handskar) sterila SHIELD Scientific handskar på sig

Standard engångshandskar av nitril och latex genomgår minimal behandling efter att de har slutfört doppnings- och torkningsstegen. Deras renhetsnivå är därför eventuellt inte lämplig för renrumsapplikationer. Kontaminering med gramnegativa bakterier före sterilisering kan bidra till kvarvarande endotoxinkontaminering. Även för sterila renrumshandskar ger sterilitet ensamt inte information om endotoxinnivån.

Dessutom kan partiklar fungera som potentiella bärare av endotoxiner. Att välja renrumshandskar med låga och kontrollerade partikelnivåer kan därför bidra till att minska risken för överföring av partikelassocierade endotoxiner och stödja den övergripande strategin för kontamineringskontroll.

Därför kan val av sterila renrumshandskar med ett påstående om låg endotoxinhalt (≤20 EU per par, enligt definitionen i EN 455-3:2023) stödja kontrollen av endotoxinkontaminering. Batchtestning ger ytterligare batchspecifik information om endotoxinnivåer.

Hur övervakas endotoxinhalten i sterila renrumshandskar?

Regelverk för endotoxinkontaminering av sterila handskar

Bilaga 1 till Europeiska unionens goda exempel (GMP) är ett av de viktigaste dokumenten som styr tillverkning och kontroll av läkemedel. Detta dokument ger vägledning för tillverkning av sterila läkemedel baserat på för kvalitetsriskhantering (QRM) , med målet att förhindra mikrobiell, partikelformig och endotoxin/pyrogenkontaminering av slutprodukten. Det kräver också att tillverkare implementerar en strategi för kontamineringskontroll (CCS) för att identifiera kritiska kontrollpunkter och bedöma effektiviteten av åtgärder för kontamineringskontroll. Som en del av denna riskbaserade strategi bör sterila renrumshandskar därför övervägas där de kan utgöra en potentiell kontamineringskälla.

EN 455-3:2023 (Medicinska handskar för engångsbruk – Del 3: Krav och testning för biologisk utvärdering) specificerar krav för utvärdering av bakteriella endotoxiner. Endotoxinnivåer uttrycks i endotoxinenheter (EU) per par handskar. För sterila handskar märkta som "låg endotoxinhalt" får endotoxinhalten inte överstiga 20 EU per par. Testning utförs i enlighet med de bakteriella endotoxintestmetoderna i Europeiska farmakopén, monografi 2.6.14.

Metoder för att detektera bakteriella endotoxiner

Testning av bakteriella endotoxiner (BET) har traditionellt förlitat sig på Limulus Amebocyte Lysate (LAL), ett reagens som utvinns från hästskokrabbans amoebocyter. LAL reagerar i närvaro av bakteriella endotoxiner och utgör grunden för flera kvalitativa och kvantitativa testmetoder.

Figur 4 – Hästskokrabba - Limulus polyphemus

Rekombinant faktor C (rFC) erbjuder ett djurfritt alternativ för bakteriell endotoxintestning. Den reviderade farmakopén 2.6.14 introducerar rFC som metod G, vilken träder i kraft den 1 januari 2027.

Testmetoder för bestämning av endotoxinnivåer på sterila handskar

För att bestämma endotoxinhalten i sterila handskar extraheras den yttre ytan av varje par med endotoxinfritt vatten i 40 till 60 minuter vid en temperatur mellan 37 °C och 40 °C. Extraktet kan sedan centrifugeras för att avlägsna partiklar innan det testas för bakteriella endotoxiner.

Traditionell LAL-baserad bakteriell endotoxintestning omfattar tre huvudtekniker:

• Gel-koaguleringstest: en kvalitativ eller semi-kvantitativ metod där närvaron av endotoxiner resulterar i gelbildning.
• Kinetiskt turbidimetriskt test: en kvantitativ metod som mäter förändringar i turbiditet över tid efter reaktionen mellan endotoxiner och LAL-reagenset.
• Kromogent test: en kvantitativ metod som mäter en färgreaktion som genereras som svar på endotoxiner.

Testresultatet uttrycks i endotoxinenheter (EU) per par handskar. Enligt EN 455-3:2023 får sterila handskar märkta som "låg endotoxinhalt" inte överstiga 20 EU per par.

SHIELD Scientific sterila handskar med låg endotoxinhalt för kritiska miljöer

För läkemedelstillverkning, produktion av implanterbara medicintekniska produkter och andra kritiska miljöer kan val av sterila renrumshandskar med specificerade låga endotoxinnivåer bidra till att minska risken för endotoxinkontaminering.

Val av handskar bör därför beaktas som en del av den övergripande strategin för kontamineringskontroll (CCS) och kvalitetsriskhantering (QRM), tillsammans med andra åtgärder som används för att kontrollera mikrobiell, partikelformig och endotoxin/pyrogenkontaminering.

SHIELD Scientific har utvecklat en serie nitril- och latexrenrumshandskar med olika renhetsnivåer som uppnås genom tvättprocesser med avjoniserat vatten. DI-klassificeringen hjälper till att identifiera dessa olika nivåer av handskrenhet:

DI – Grundläggande kontamineringskontroll: Renrumshandskar med en enda tvätt med avjoniserat vatten, med en partikelnivåspecifikation på

DI+ – Hög kontamineringskontroll: Renrumshandskar med tre tvättar med avjoniserat vatten, med en partikelnivåspecifikation på

DI++ – Extrem kontamineringskontroll: Renrumshandskar med flera tvättar med avjoniserat vatten, med en partikelnivåspecifikation på

SHIELDskin XTREME™ sterila renrumshandskar är utformade för att stödja kontamineringskontroll i kritiska miljöer, inklusive läkemedelstillverkningsmiljöer som arbetar enligt GMP-krav. SHIELD Scientific sterila nitril- och latexrenrumshandskar är batchtestade för endotoxiner, med en specificerad endotoxinnivå på

Ett bestrålningsintyg (CoI) medföljer varje sats av SHIELD Scientific sterila nitril- och latexrenrumshandskar. Ett intyg om överensstämmelse (CoC) ger satsspecifika uppgifter om partikel- och endotoxinnivåer, vilket stöder dokumentationen av handskarnas renhet och kontamineringskontroll.

Letar du efter sterila renrumshandskar med kontrollerade partikel- och endotoxinnivåer?

BEGÄR PROVER eller KONTAKTA SHIELD Scientific EN REPRESENTANT för att diskutera de mest lämpliga handskarna för dina behov av kontamineringskontroll.