Welke wegwerphandschoenen moet u dragen tijdens RNA-extractie met TRIzol®?
RNA speelt een cruciale rol bij genexpressie en fungeert als intermediair tussen DNA en eiwitten. De extractie van DNA, RNA en eiwitten is een belangrijke stap in het onderzoek naar moleculaire genetica. Het dragen van geschikte persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM's) tijdens RNA-extractie is essentieel om besmetting met RNase te voorkomen, wat de resultaten zou kunnen vertekenen. Daarnaast vereisen extractiemethoden vaak het gebruik van organische oplosmiddelen. Afhankelijk van de gebruikte extractiemethode de keuze van de juiste laboratoriumhandschoenen van cruciaal belang, met name handschoenen die de beste weerstand bieden tegen de chemicaliën waarmee gewerkt wordt. Daarom is het zo belangrijk om zorgvuldig de wegwerphandschoenen te kiezen die u draagt tijdens RNA-extractie met TRIzol® of vergelijkbare reagentia.
Wat is de meest gebruikte methode voor RNA-extractie?
De guanidiniumthiocyanaat-fenol-chloroform-extractiemethode wordt in de moleculaire biologie veel gebruikt om RNA (en soms ook DNA en eiwitten) te isoleren uit diverse monsters (menselijk/dierlijk weefsel; planten; gist; bacteriën).
Sinds de publicatie van de Chomczynski-Sacchi-methode in 1987 (bron: Chomczynski – Sacchi – 1987. “Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.” https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ), is dit de referentiemethode geworden. Hoewel er tegenwoordig talloze alternatieve methoden bestaan, zoals extractiekits, geven veel gebruikers nog steeds de voorkeur aan deze handmatige methode.
Verschillende bedrijven brengen reagentia voor dit extractieproces op de markt onder diverse handelsnamen, zoals TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx) en andere.
Het guanidiniumthiocyanaat-fenol-chloroform-extractieprotocol maakt de gelijktijdige oplossing van eiwitten, lipiden en nucleïnezuren mogelijk, terwijl de integriteit van RNA behouden blijft. Het belangrijkste voordeel van deze methode is de mogelijkheid om tegelijkertijd RNA, DNA en eiwitten uit hetzelfde monster te isoleren door simpelweg de extractiefase aan te passen. De grootste uitdaging ligt echter in de omgang met de giftige en vluchtige reagentia die bij het proces betrokken zijn.
Welke risico's lopen de reagentia die gebruikt worden voor RNA-extractie?
In dit artikel verwijzen we specifiek naar "TRIzol®" — de commerciële oplossing die we gebruiken in onze chemische bestendigheidstests op laboratoriumhandschoenen (chemische permeatie).
Al deze reagentia bestaan uit een mengsel van fenol (oplosmiddel) en guanidiniumthiocyanaat (chaotropisch middel).
Deze reagentia zijn voorzien van diverse gevaarswaarschuwingen en symbolen overeenkomstig Verordening (EG) nr. 1272/2008 betreffende de classificatie, etikettering en verpakking (CLP-verordening) van stoffen en mengsels:
De samenstelling van deze reagentia omvat:
- Fenol: Een zeer corrosieve stof voor de huid en ogen, giftig bij inademing, inslikken en huidcontact. Het kan ernstige brandwonden en verwondingen veroorzaken.
- Guanidiniumthiocyanaat: Bijtend voor de huid en ogen, giftig bij inademing, inslikken en huidcontact, en kan irritaties en brandwonden veroorzaken.
Bij het hanteren van deze reagentia onder een zuurkast om blootstelling aan giftige dampen te vermijden, lopen gebruikers chemische risico's, met name via huidcontact.
Laboratoriummedewerkers hanteren doorgaans de commerciële verpakkingen (100-200 ml), waarbij het risico bestaat op morsen. Tijdens de monsterverwerking komen medewerkers ook in aanraking met TRIzol® (micropipetteren, monsters vortexen, microbuisjes openen/sluiten, monsters vermalen, enz.).
Het is daarom van cruciaal belang om bij het hanteren van deze chemicaliën de juiste persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM's) te gebruiken, zoals laboratoriumhandschoenen .
Welke wegwerphandschoenen zijn geschikt voor het hanteren van reagentia voor RNA-extractie?
Gezien de betrokken chemicaliën is het dragen van geschikte wegwerphandschoenen van het grootste belang. Medewerkers dienen te beoordelen of de handschoenen die zij gewoonlijk voor deze taken dragen, geschikt zijn voor het hanteren van deze reagentia.
De voorkeur moet worden gegeven aan nitril- of nitril/neopreen-wegwerphandschoenen in plaats van handschoenen van natuurlijk rubberlatex. Nitrilhandschoenen zijn namelijk beter bestand tegen organische oplosmiddelen.
De SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 , SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300en ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 handschoenen zijn bijzonder geschikt voor bescherming tegen spatten bij het hanteren van RNA-extractiereagentia.
De chemische permeatietests met TRIzol® op deze handschoenen leverden de volgende resultaten op:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minuten
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300: 100 minuten
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minuten
Voor gebruik in moleculairbiologische laboratoria raden we de ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250-handschoen aan, die de beste balans tussen bescherming en prijs lijkt te bieden.
De SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260en ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 handschoenen worden allemaal geproduceerd met behulp van twinSHIELD™ -technologie. Deze dubbele dompeltechniek creëert een handschoen met twee lagen. Dankzij twinSHIELD™ -technologie bereiken deze handschoenen een AQL van 0,25, het hoogste beschermingsniveau op de markt, wat de veiligheid van de gebruiker verbetert. voor meer informatie over het belang van de AQL van laboratoriumhandschoenen.
Neem geen risico's tijdens uw RNA-extracties – draag handschoenen die geschikt zijn voor het hanteren van reagentia. Raadpleeg onze handleiding voor handschoenselectie en de handleiding voor chemische bestendigheid , of neem contact op met uw SHIELD Scientific verkoopvertegenwoordiger voor een weloverwogen keuze.
Deel deze interessante informatie
