Quali guanti monouso dovresti indossare durante l'estrazione dell'RNA con TRIzol®?
L'RNA svolge un ruolo cruciale nell'espressione genica, fungendo da intermediario tra il DNA e le proteine. L'estrazione di DNA, RNA e proteine è una fase fondamentale nello studio della genetica molecolare. Indossare dispositivi di protezione individuale (DPI) adeguati durante l'estrazione dell'RNA è essenziale per evitare la contaminazione da RNasi, che potrebbe falsare i risultati. Inoltre, i metodi di estrazione spesso richiedono l'uso di solventi organici. A seconda del metodo di estrazione utilizzato, la scelta dei guanti da laboratorio più adatti è fondamentale, in particolare guanti che offrano la migliore resistenza alle sostanze chimiche manipolate. Ecco perché è così importante selezionare con cura i guanti monouso da indossare durante l'estrazione dell'RNA con TRIzol® o reagenti simili.
Qual è il metodo di estrazione dell'RNA più utilizzato?
Il metodo di estrazione con tiocianato di guanidinio-fenolo-cloroformio è ampiamente utilizzato in biologia molecolare per isolare l'RNA (e occasionalmente il DNA e le proteine) da vari campioni (tessuti umani/animali; piante; lievito; batteri).
Dalla pubblicazione del metodo Chomczynski-Sacchi nel 1987 (Fonte: Chomczynski – Sacchi – 1987. “Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.” https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ), questo è diventato il metodo di riferimento. Sebbene oggi esistano numerosi metodi alternativi, come i kit di estrazione, molti utenti preferiscono ancora questo metodo manuale.
Diverse aziende commercializzano reagenti per questo processo di estrazione con vari nomi commerciali, come TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx) e altri.
Il protocollo di estrazione con tiocianato di guanidinio-fenolo-cloroformio consente la dissoluzione simultanea di proteine, lipidi e acidi nucleici, mantenendo l'integrità dell'RNA. Il vantaggio principale di questo metodo è la capacità di isolare simultaneamente RNA, DNA e proteine dallo stesso campione semplicemente regolando la fase di recupero. Tuttavia, la sfida principale risiede nella gestione dei reagenti tossici e volatili coinvolti nel processo.
Quali sono i pericoli dei reagenti utilizzati per l'estrazione dell'RNA?
In questo articolo faremo riferimento specificamente a "TRIzol®", la soluzione commerciale utilizzata nei nostri test di resistenza chimica sui guanti da laboratorio (permeazione chimica).
Tutti questi reagenti sono costituiti da una miscela di fenolo (solvente) e tiocianato di guanidinio (agente caotropico).
Questi reagenti riportano diverse avvertenze e simboli di pericolo in conformità al Regolamento (CE) n. 1272/2008 sulla “classificazione, etichettatura e imballaggio” (Regolamento CLP) delle sostanze e delle miscele:
La composizione di questi reagenti comprende:
- Fenolo: composto altamente corrosivo per la pelle e gli occhi, tossico per inalazione, ingestione e contatto con la pelle. Può causare gravi ustioni e lesioni.
- Tiocianato di guanidinio: corrosivo per la pelle e gli occhi, tossico per inalazione, ingestione e contatto con la pelle e può causare irritazioni e ustioni.
Quando si maneggiano questi reagenti sotto una cappa aspirante per evitare l'esposizione a vapori tossici, gli utenti sono esposti a rischi chimici, in particolare attraverso il contatto con la pelle.
Gli operatori di laboratorio maneggiano in genere le confezioni commerciali (100-200 ml), con il rischio di fuoriuscite accidentali. Durante la fase di elaborazione dei campioni, gli operatori sono inoltre esposti al TRIzol® (micropipettaggio, agitazione dei campioni, apertura/chiusura di microtubi, macinazione dei campioni, ecc.).
Pertanto, è fondamentale garantire l'uso di adeguati Dispositivi di Protezione Individuale (DPI), come da laboratorio , quando si maneggiano queste sostanze chimiche..
Quali guanti monouso sono adatti per maneggiare i reagenti per l'estrazione dell'RNA?
Considerate le sostanze chimiche coinvolte, indossare guanti monouso adatti è di fondamentale importanza. Gli operatori devono valutare se i guanti che indossano abitualmente per queste attività sono adatti alla manipolazione di questi reagenti.
Si dovrebbe dare priorità ai guanti monouso in nitrile o nitrile/neoprene piuttosto che ai guanti in lattice di gomma naturale. I guanti in nitrile sono infatti più resistenti ai solventi organici.
I SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 e SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300, nonché ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250, sono particolarmente adatti per la protezione dagli schizzi durante la manipolazione di reagenti per l'estrazione dell'RNA.
I test di permeazione chimica con TRIzol® su questi guanti hanno prodotto i seguenti risultati:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minuti
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260/300: 100 minuti
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minuti
Per l'utilizzo nei laboratori di biologia molecolare, raccomandiamo il ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250, che sembra offrire il miglior equilibrio tra protezione e costo.
I SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260ed ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 sono tutti realizzati con twinSHIELD™ la tecnologia. Questa tecnica di doppia immersione crea un guanto a doppio strato. Grazie alla twinSHIELD™ , questi guanti raggiungono un AQL di 0,25, il livello di protezione più elevato sul mercato, garantendo una maggiore sicurezza per l'operatore. Per saperne di più sull'importanza dell'AQL dei guanti da laboratorio, vi invitiamo a leggere il nostro articolo dedicato.
Durante le estrazioni di RNA, evitate di correre rischi: indossate guanti adatti alla manipolazione dei reagenti. Consultate la nostra guida alla selezione dei guanti e la guida alla resistenza chimica oppure contattate il vostro SHIELD Scientific rappresentante commerciale per una scelta consapevole.
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