¿Qué guantes desechables debes usar durante la extracción de ARN con TRIzol®?
El ARN desempeña un papel crucial en la expresión génica, actuando como intermediario entre el ADN y las proteínas. La extracción de ADN, ARN y proteínas es un paso fundamental en el estudio de la genética molecular. El uso del equipo de protección personal (EPP) adecuado durante la extracción de ARN es esencial para evitar la contaminación con ARNasa, que podría alterar los resultados. Además, los métodos de extracción suelen requerir el uso de disolventes orgánicos. Dependiendo del método de extracción utilizado, seleccionar los guantes de laboratorio adecuados , específicamente aquellos que ofrezcan la mejor resistencia a los productos químicos que se manipulan. Por ello, es tan importante seleccionar cuidadosamente los guantes desechables que se utilizan durante la extracción de ARN con TRIzol® o reactivos similares.
¿Cuál es el método de extracción de ARN más utilizado?
El método de extracción con tiocianato de guanidinio-fenol-cloroformo se utiliza ampliamente en biología molecular para aislar ARN (y ocasionalmente ADN y proteínas) de diversas muestras (tejidos humanos/animales; plantas; levaduras; bacterias).
Desde la publicación del método de Chomczynski-Sacchi en 1987 (Fuente: Chomczynski – Sacchi – 1987. “Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.” https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ), este se ha convertido en el método de referencia. Si bien hoy en día existen numerosos métodos alternativos, como los kits de extracción, muchos usuarios aún prefieren este método manual.
Varias empresas comercializan reactivos para este proceso de extracción bajo diversos nombres comerciales, como TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx), y otros.
El protocolo de extracción con tiocianato de guanidinio-fenol-cloroformo permite la disolución simultánea de proteínas, lípidos y ácidos nucleicos, manteniendo la integridad del ARN. La principal ventaja de este método es su capacidad para aislar simultáneamente ARN, ADN y proteínas de la misma muestra con solo ajustar la fase de recuperación. Sin embargo, el principal desafío radica en el manejo de los reactivos tóxicos y volátiles involucrados en el proceso.
¿Cuáles son los Riesgos de los reactivos utilizados para la extracción de ARN?
En este artículo nos referimos específicamente a “TRIzol®”, la solución comercial utilizada en nuestras pruebas de resistencia química en guantes de laboratorio (permeabilidad química).
Todos estos reactivos consisten en una mezcla de fenol (disolvente) y tiocianato de guanidinio (agente caotrópico).
Estos reactivos llevan varias advertencias y símbolos de peligro de acuerdo con el Reglamento (CE) n.º 1272/2008 sobre “clasificación, etiquetado y envasado” (Reglamento CLP) de sustancias y mezclas:
La composición de estos reactivos incluye:
- Fenol: Compuesto altamente corrosivo para la piel y los ojos, tóxico por inhalación, ingestión y contacto con la piel. Puede causar quemaduras y lesiones graves.
- Tiocianato de guanidinio: Corrosivo para la piel y los ojos, tóxico por inhalación, ingestión y contacto con la piel y puede causar irritaciones y quemaduras.
Al manipular estos reactivos bajo una campana extractora para evitar la exposición a vapores tóxicos, los usuarios están expuestos a riesgos químicos, especialmente a través del contacto con la piel.
Los operarios de laboratorio suelen manipular los envases comerciales (100-200 ml), lo que conlleva el riesgo de derrames accidentales. Durante la fase de procesamiento de muestras, los operarios también están expuestos a TRIzol® (micropipeteo, agitación de muestras, apertura/cierre de microtubos, molienda de muestras, etc.).
Por lo tanto, es fundamental garantizar el uso de equipos de protección individual (EPI) adecuados, como de laboratorio , al manipular estos productos químicos..
¿Qué guantes desechables son adecuados para manipular reactivos de extracción de ARN?
Dadas las sustancias químicas involucradas, es fundamental usar guantes desechables adecuados. Los operadores deben evaluar si los guantes que suelen usar para estas tareas son adecuados para manipular estos reactivos.
Se debe dar prioridad a los guantes desechables de nitrilo o de nitrilo/neopreno en lugar de los de látex de caucho natural. Los guantes de nitrilo son, de hecho, más resistentes a los disolventes orgánicos.
Los SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 , SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300y ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 son especialmente adecuados para la protección contra salpicaduras al manipular reactivos de extracción de ARN.
Las pruebas de permeación química con TRIzol® realizadas en estos guantes arrojaron los siguientes resultados:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minutos
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300: 100 minutos
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minutos
Para su uso en laboratorios de biología molecular, recomendamos el ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250, que parece ofrecer el mejor equilibrio entre protección y coste.
Los SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260y ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 se fabrican con twinSHIELD™ la tecnología. Esta técnica de doble inmersión crea un guante de doble capa. Gracias a la twinSHIELD™ , estos guantes alcanzan un AQL de 0,25, el nivel de protección más alto del mercado, lo que proporciona mayor seguridad al operario. Para obtener más información sobre la importancia del AQL en guantes de laboratorio, dedique unos minutos a leer nuestro artículo especializado.
No corra riesgos durante sus extracciones de ARN: use guantes adecuados para manipular reactivos. Consulte nuestra guía de selección de guantes y la guía de resistencia química , o póngase en contacto con su SHIELD Scientific representante de ventas para elegir los guantes adecuados.
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