Hvilke engangshandsker skal man bruge under RNA-ekstraktion med TRIzol®?
RNA spiller en afgørende rolle i genekspression og fungerer som mellemled mellem DNA og proteiner. Ekstraktion af DNA, RNA og proteiner er et vigtigt trin i studiet af molekylær genetik. Det er vigtigt at bære passende personlige værnemidler (PPE) under RNA-ekstraktion for at undgå kontaminering med RNase, som kan forvrænge resultaterne. Derudover kræver ekstraktionsmetoder ofte brug af organiske opløsningsmidler. Afhængigt af den anvendte ekstraktionsmetode at vælge de rigtige laboratoriehandsker , især handsker, der tilbyder den bedste modstandsdygtighed over for de kemikalier, der håndteres. Derfor er det så vigtigt omhyggeligt at vælge de engangshandsker, du bruger under RNA-ekstraktion med TRIzol® eller lignende reagenser.
Hvad er den mest anvendte RNA-ekstraktionsmetode?
Guanidiniumthiocyanat-phenol-chloroform-ekstraktionsmetoden er meget anvendt i molekylærbiologi til at isolere RNA (og lejlighedsvis DNA og proteiner) fra forskellige prøver (menneskeligt/animalsk væv; planter; gær; bakterier).
Siden udgivelsen af Chomczynski-Sacchi-metoden i 1987 (Kilde: Chomczynski-Sacchi-1987. “Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction.” https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ), er dette blevet referencemetoden. Selvom der findes adskillige alternative metoder i dag, såsom ekstraktionskit, foretrækker mange brugere stadig denne manuelle metode.
Adskillige virksomheder markedsfører reagenser til denne ekstraktionsproces under forskellige kommercielle navne, såsom TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx) og andre.
Guanidiniumthiocyanat-phenol-chloroform-ekstraktionsprotokollen muliggør samtidig opløsning af proteiner, lipider og nukleinsyrer, samtidig med at RNA'ets integritet opretholdes. Den primære fordel ved denne metode er dens evne til samtidigt at isolere RNA, DNA og proteiner fra den samme prøve ved blot at justere genvindingsfasen. Den største udfordring ligger dog i håndteringen af de giftige og flygtige reagenser, der er involveret i processen.
Hvad er farerne ved de reagenser, der anvendes til RNA-ekstraktion?
I denne artikel refererer vi specifikt til "TRIzol®" – den kommercielle opløsning, der anvendes i vores kemiske resistenstest på laboratoriehandsker (kemisk permeation).
Alle disse reagenser består af en blanding af phenol (opløsningsmiddel) og guanidiniumthiocyanat (kaotropisk middel).
Disse reagenser er forsynet med forskellige fareadvarsler og -symboler i henhold til forordning (EF) nr. 1272/2008 om "klassificering, mærkning og emballering" (CLP-forordningen) af stoffer og blandinger:
Sammensætningen af disse reagenser omfatter:
- Fenol: En stærkt ætsende forbindelse for hud og øjne, giftig ved indånding, indtagelse og hudkontakt. Den kan forårsage alvorlige forbrændinger og skader.
- Guanidiniumthiocyanat: Ætsende for hud og øjne, giftig ved indånding, indtagelse og hudkontakt og kan forårsage irritation og forbrændinger.
Når disse reagenser håndteres under et stinkskab for at undgå eksponering for giftige dampe, udsættes brugerne for kemiske risici, især ved hudkontakt.
Laboratorieoperatører håndterer typisk den kommercielle emballage (100-200 ml), hvor der er risiko for utilsigtet spild. Under prøvebehandlingsfasen udsættes operatørerne også for TRIzol® (mikropipettering, vortexing af prøver, åbning/lukning af mikrorør, prøveformaling osv.).
Derfor er det afgørende at sikre brugen af passende personlige værnemidler (PPE), såsom laboratoriehandsker , når man håndterer disse kemikalier..
Hvilke engangshandsker er egnede til håndtering af RNA-ekstraktionsreagenser?
I betragtning af de involverede kemikalier er det af største vigtighed at bruge egnede engangshandsker. Operatører bør vurdere, om de handsker, de typisk bruger til disse opgaver, er egnede til håndtering af disse reagenser.
Engangshandsker af nitril eller nitril/neopren bør prioriteres frem for handsker af naturgummilatex. Nitrilhandsker er faktisk mere modstandsdygtige over for organiske opløsningsmidler.
SHIELDskin SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 og SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300samt ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 handskerne er særligt velegnede til beskyttelse mod stænk ved håndtering af RNA-ekstraktionsreagenser.
De kemiske permeationstests med TRIzol® på disse handsker gav følgende resultater:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minutter
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300: 100 minutter
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minutter
Til brug i molekylærbiologiske laboratorier anbefaler vi ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250-handsken, som ser ud til at tilbyde den bedste balance mellem beskyttelse og pris.
SHIELDskin SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260og ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 handskerne er alle fremstillet ved hjælp af twinSHIELD™ -teknologi. Denne dobbeltdypningsteknik skaber en handske med to lag. Takket være twinSHIELD™ -teknologien opnår disse handsker en AQL på 0,25, det højeste beskyttelsesniveau på markedet, hvilket giver bedre operatørsikkerhed. For at lære mere om vigtigheden af AQL for laboratoriehandsker, så brug et par minutter på at læse vores dedikerede artikel.
Tag ingen risici under dine RNA-ekstraktioner – brug handsker, der er egnede til håndtering af reagenser. Se vores guide til valg af handsker og guide til kemisk resistens eller kontakt din SHIELD Scientific salgsrepræsentant for at træffe et velinformeret valg.
Del denne interessante information
