KONTROL AF ENDOTOKSINKONTAMINERING PÅ STERILE RENRUMSHANDSKER
Injicerbare lægemidler eller implanterbart medicinsk udstyr, der er kontamineret med endotoksiner, kan forårsage en meget alvorlig patientreaktion.
Endotoksin-kontaminering af batcher af injicerbare opløsninger eller implantater kan også have betydelige økonomiske konsekvenser for producenten.
Derfor er overvågning af endotoksin-kontaminering på sterile nitrilhandsker og latexhandsker til renrum en central bekymring i kritiske miljøer, herunder industrien for implanterbart medicinsk udstyr og medicinalindustrien.
Hvad er bakterielle endotoksiner, og deres virkning?
Hvad er bakterielle endotoksiner?
Endotoksiner, også kendt som lipopolysaccharider (LPS), er komponenter i den ydre membran af gramnegative bakterier. Eksempler på gramnegative bakterier omfatter E. coli, Salmonella, Legionella og Neisseria.
Figur 1 – Cellevæg hos grampositive og gramnegative bakterier
Gram-negative bakterier er bredt forekommende i miljøet, herunder i vandsystemer og fordøjelseskanalen. Endotoksiner kan frigives, når disse bakterier nedbrydes eller lyseres, og kan forblive til stede, selv når bakterierne i sig selv ikke længere er levedygtige.
Hvad er konsekvenserne af endotoksin-kontaminering?
Bakterielle endotoksiner kan aktivere menneskers og dyrs immunsystem og udløse en inflammatorisk reaktion. Afhængigt af eksponeringsniveauet kan denne reaktion variere fra feber til mere alvorlige systemiske reaktioner.
Feber er en af de karakteristiske reaktioner på endotoksineksponering. Derfor klassificeres bakterielle endotoksiner som pyrogener, stoffer der kan forårsage en stigning i kropstemperaturen.
Når endotoksiner kommer ind i blodbanen, kan høje eksponeringsniveauer udløse alvorlige systemiske inflammatoriske reaktioner. Derfor er endotoksinkontrol særligt vigtig for injicerbare lægemidler og andre produkter, der er beregnet til at komme i kontakt med blodbanen.
I kritiske miljøer, som f.eks. i den farmaceutiske industri, er endotoksinovervågning afgørende. Dette er især vigtigt i produktionen af vand af farmaceutisk kvalitet, parenterale og injicerbare lægemidler, herunder infusions- og dialysevæsker, og implanterbart medicinsk udstyr.
Reduktion af endotoksinniveauer på renrumshandsker
Endotoksiner er kendt for at være den mest almindelige kilde til pyrogener i lægemidler og medicinsk udstyr.
Endotoksiner er membranrester fra gramnegative bakterier, som er bredt forekommende i miljøet. Derudover er endotoksiner meget resistente over for desinfektions- eller steriliseringsprocesser, herunder gammabestråling.
Derfor bør den biologiske belastning af nitril- og latexhandsker begrænses så meget som muligt inden sterilisering.
Biobelastning er populationen af levedygtige mikroorganismer, der findes på eller i et produkt. Potentielle kilder til biobelastning under handskeproduktion omfatter:
- Råmaterialer og procesvand anvendt under fremstillingen.
- Operatører involveret i fremstillingsprocessen.
- Rengøring og pakning af handsker.
Den biologiske belastning af SHIELD Scientific sterile handsker testes af et uafhængigt eksternt laboratorium i overensstemmelse med ISO 11737-1 som en del af SHIELD Scientific kvalitetskontrolproces.
Ved kritiske anvendelser kan det derfor være nødvendigt at overveje både sterilitet og endotoksinkontrol ved valg af materialer og beskyttelsesudstyr, der kan bidrage til produktkontaminering.
Sterilitet: For strålingssteriliserede handsker skal steriliseringsprocessen valideres for at opnå det specificerede sterilitetssikringsniveau (SAL). ISO 11137-2 definerer metoder til fastlæggelse af den steriliseringsdosis, der kræves for at opnå en SAL på 10⁻⁶.
Figur 2 – SHIELDskin XTREME™ sterile handsker PE-pose med steriliseringsindikator
Endotoksinkontrol: Sterilisering og endotoksinkontrol er ikke det samme. Sterilisering har til formål at kontrollere levedygtige mikroorganismer, hvorimod bakterielle endotoksiner kan forblive, selv efter at mikroorganismerne ikke længere er levedygtige. Derfor er det vigtigt at kontrollere biobyrden og endotoksinniveauerne gennem hele handskefremstillingsprocessen, herunder gennem passende vask og renlighedskontroller før sterilisering.
Hvorfor er det vigtigt at kontrollere endotoksinniveauerne på sterile renrumshandsker?
Sterilitet og lave endotoksinniveauer er to forskellige aspekter af kontamineringskontrol. En steril handske har gennemgået en valideret steriliseringsproces for at kontrollere levedygtige mikroorganismer, men dette garanterer ikke nødvendigvis et lavt endotoksinniveau.
For farmaceutiske producenter og producenter af implanterbart medicinsk udstyr bør endotoksin-kontaminering derfor tages i betragtning gennem hele produktionsprocessen, fra råmaterialer til færdige produkter, inklusive beskyttelsesudstyr, der bæres af renrumsoperatører.
faktisk være i direkte kontakt med injicerbare opløsninger eller deres beholdere og implanterbart medicinsk udstyr. Handsker er derfor potentielt en kilde til kontaminering.
Figur 3 – Operatør, der skifter nål på en påfyldningsmaskine, mens han/hun bærer to par (dobbelthandsker) sterile SHIELD Scientific handsker
Standard engangshandsker af nitril og latex gennemgår minimal behandling, når de har gennemført dyppe- og tørretrinnene. Deres renhedsniveau er derfor muligvis ikke egnet til renrumsapplikationer. Kontaminering med gramnegative bakterier før sterilisering kan bidrage til resterende endotoksin-kontaminering. Selv for sterile renrumshandsker giver sterilitet alene ikke information om endotoksinniveauet.
Derudover kan partikler fungere som potentielle bærere af endotoksiner. Valg af renrumshandsker med lave og kontrollerede partikelniveauer kan derfor bidrage til at reducere risikoen for overførsel af partikelassocierede endotoksiner og understøtte den overordnede strategi for kontamineringskontrol.
Derfor kan valg af sterile renrumshandsker med en lav endotoksin-erklæring (≤20 EU pr. par, som defineret i EN 455-3:2023) understøtte kontrol af endotoksin-kontaminering. Batchtestning giver yderligere batchspecifik information om endotoksinniveauer.
Hvordan overvåges endotoksinniveauet i sterile renrumshandsker?
Reguleringsramme for endotoksin-kontaminering af sterile handsker
Bilag 1 til Den Europæiske Unions GMP er et af de vigtigste dokumenter, der regulerer fremstilling og kontrol af lægemidler. Dette dokument giver vejledning til fremstilling af sterile lægemidler baseret på for kvalitetsrisikostyring (QRM) med det formål at forhindre mikrobiel, partikel- og endotoksin/pyrogen-kontaminering af slutproduktet. Det kræver også, at producenter implementerer en kontamineringskontrolstrategi (CCS) for at identificere kritiske kontrolpunkter og vurdere effektiviteten af kontamineringskontrolforanstaltninger. Som en del af denne risikobaserede tilgang bør sterile renrumshandsker derfor overvejes, hvor de kan udgøre en potentiel kilde til kontaminering.
EN 455-3:2023 (Medicinske handsker til engangsbrug – Del 3: Krav og test til biologisk evaluering) specificerer krav til evaluering af bakterielle endotoksiner. Endotoksinniveauer udtrykkes i endotoksinenheder (EU) pr. par handsker. For sterile handsker mærket som "lav endotoksin" må endotoksinindholdet ikke overstige 20 EU pr. par. Testning udføres i overensstemmelse med de bakterielle endotoksintestmetoder i Den Europæiske Farmakopé, Monografi 2.6.14.
Metoder til påvisning af bakterielle endotoksiner
Test af bakterielle endotoksiner (BET) har traditionelt været baseret på Limulus Amebocyte Lysate (LAL), et reagens udvundet af hesteskokrabbe-amøbocytter. LAL reagerer i nærvær af bakterielle endotoksiner og danner grundlag for adskillige kvalitative og kvantitative testmetoder.
Figur 4 – Hesteskokrabbe - Limulus polyphemus
Rekombinant faktor C (rFC) er et dyrefrit alternativ til bakteriel endotoksintestning. Den reviderede Ph. Eur. 2.6.14 introducerer rFC som metode G, som træder i kraft den 1. januar 2027.
Testmetoder til bestemmelse af endotoksinniveauer på sterile handsker
For at bestemme endotoksinniveauet i sterile handsker ekstraheres den ydre overflade af hvert par med endotoksinfrit vand i 40 til 60 minutter ved en temperatur mellem 37 °C og 40 °C. Ekstraktet kan derefter centrifugeres for at fjerne partikler, før det testes for bakterielle endotoksiner.
Traditionel LAL-baseret bakteriel endotoksintestning omfatter tre hovedteknikker:
- Gel-koaguleringstest: en kvalitativ eller semi-kvantitativ metode, hvor tilstedeværelsen af endotoksiner resulterer i geldannelse.
- Kinetisk turbidimetrisk test: en kvantitativ metode, der måler ændringer i turbiditet over tid efter reaktionen mellem endotoksiner og LAL-reagenset.
- Kromogen test: en kvantitativ metode, der måler en farvereaktion genereret som reaktion på endotoksiner.
Testresultatet udtrykkes i endotoksinenheder (EU) pr. par handsker. I henhold til EN 455-3:2023 må sterile handsker mærket som "lav endotoksin" ikke overstige 20 EU pr. par.
SHIELD Scientific sterile handsker med lavt endotoksinindhold til kritiske miljøer
Til farmaceutisk fremstilling, produktion af implanterbart medicinsk udstyr og andre kritiske miljøer kan valg af sterile renrumshandsker med specificerede lave endotoksinniveauer bidrage til at reducere risikoen for endotoksin-kontaminering.
Valg af handsker bør derfor overvejes som en del af den overordnede strategi for kontamineringskontrol (CCS) og kvalitetsrisikostyring (QRM) sammen med andre foranstaltninger, der anvendes til at kontrollere mikrobiel, partikel- og endotoksin/pyrogenkontaminering.
SHIELD Scientific har udviklet en række nitril- og latex-renrumshandsker med forskellige renhedsniveauer opnået gennem vaskeprocesser med deioniseret vand. DI-klassificeringen hjælper med at identificere disse forskellige niveauer af handskerenshed:
DI – Grundlæggende kontamineringskontrol: Renrumshandsker med en enkelt vask med deioniseret vand, med en partikelniveauspecifikation på
DI+ – Høj kontamineringskontrol: Renrumshandsker med tre skylninger med deioniseret vand, med en partikelniveauspecifikation på
DI++ – Ekstrem kontamineringskontrol: Renrumshandsker med flere skylninger med deioniseret vand, med en partikelniveauspecifikation på
SHIELDskin XTREME™ sterile renrumshandsker er designet til at understøtte kontamineringskontrol i kritiske miljøer, herunder farmaceutiske produktionsmiljøer, der opererer under GMP-krav. SHIELD Scientific sterile nitril- og latexrenrumshandsker er batchtestet for endotoksiner med et specificeret endotoksinniveau på
Et bestrålingscertifikat (CoI) leveres med hvert parti af SHIELD Scientific sterile nitril- og latex-renrumshandsker. Et overensstemmelsescertifikat (CoC) indeholder batchspecifikke data om partikel- og endotoksinniveauer, der understøtter dokumentationen af handskerens og kontamineringskontrol.
Leder du efter sterile renrumshandsker med kontrollerede partikel- og endotoksinniveauer?
ANMOD OM PRØVER eller KONTAKT EN SHIELD Scientific REPRÆSENTANT for at drøfte de bedst egnede handsker til dine behov for kontamineringskontrol.
Del denne interessante information
Nej. En steril renrumshandske har ikke nødvendigvis et lavt endotoksinniveau. Sterilisering har til formål at bekæmpe levedygtige mikroorganismer, men bakterielle endotoksiner kan forblive, selv når mikroorganismerne ikke længere er levedygtige. Sterilitet og endotoksinniveauer er derfor to forskellige aspekter af kontamineringskontrol. Når lave endotoksinniveauer er påkrævet, bør de understøttes af en specificeret endotoksingrænse og passende test. I henhold til EN 455-3:2023 må sterile handsker mærket som "lav endotoksin" ikke overstige 20 EU pr. par.
For sterile handsker refererer "lav endotoksin" til et kontrolleret og testet niveau af bakterielle endotoksiner. Endotoksinniveauer kan bestemmes ved hjælp af testmetoden beskrevet i EN 455-3:2023 og udtrykkes i endotoksinenheder (EU) pr. par handsker. EN 455-3:2023 sætter engrænse på 20 EU pr. par for påstanden "lav endotoksin" inden for standardens anvendelsesområde. Et lavt endotoksinniveau er forskelligt fra sterilitet og bør derfor specifikt testes, når endotoksinforurening skal kontrolleres.
Måling af bakterielle endotoksiner på sterile renrumshandsker involverer to nøglefaser: genvinding af potentiel endotoksin-kontaminering fra handskeoverfladen og måling af den ved hjælp af en passende bakteriel endotoksin-test. Endotoksinfrit vand bruges til at opsamle endotoksiner, der kan være til stede på handsken, så den resulterende prøve kan analyseres. Detektion kan udføres ved hjælp af etablerede Limulus Amebocyte Lysate (LAL)-analyser eller rekombinant faktor C (rFC)-teknologi. Resultatet giver et kvantitativt mål for endotoksinniveauet og rapporteres i endotoksinenheder pr. par handsker (EU/par), hvilket gør det muligt at vurdere forskellige handskespecifikationer på et ensartet grundlag.
Partikelrenhed og endotoksinniveauer beskriver forskellige aspekter af en steril renrumshandskes kontamineringsprofil og bør vurderes separat. Disse parametre bør ikke behandles som udskiftelige: partikelniveauer karakteriserer partikelrenhed, mens endotoksintestning omhandler bakteriel endotoksinkontaminering. Det er vigtigt at bemærke, at et lavt partikelniveau ikke kan bruges til at forudsige et lavt endotoksinniveau. Evaluering af begge specifikationer giver derfor en mere komplet kontamineringsprofil, når man vælger sterile renrumshandsker til kritiske anvendelser.
For endotoksinfølsomme anvendelser bør udgangspunktet være et klart specificeret og testet endotoksinniveau for den sterile renrumshandske. Denne specifikation bør overvejes i forhold til kontamineringsrisici og renlighedskrav i den faktiske proces, snarere end udelukkende at stole på sterilitet eller renrumsklassificering. Støttende dokumentation bør indeholde testdata for de relevante renlighedsegenskaber, så brugerne kan verificere handskens endotoksinspecifikation og vurdere dens egnethed til den tilsigtede renrumsanvendelse.
HAR DU NOGEN SPØRGSMÅL?
Ofte stillede spørgsmål
Leder du efter svar om renrumshandsker eller laboratoriehandsker? Denne FAQ-sektion dækker vigtige emner som brug af engangshandsker, kontamineringskontrol, håndbeskyttelse og valg af handsker. Udforsk praktisk vejledning, eller kontakt SHIELD Scientific for at finde den mest passende løsning til din renrums- eller laboratorieapplikation.
Kontakt os