注射用药物或植入式医疗器械若被内毒素污染，可能会引起非常严重的患者反应。.

注射液或植入物批次受到内毒素污染，也会给生产商带来重大的经济损失。.

因此，监测无菌洁净室丁腈手套和乳胶手套上的内毒素污染是关键环境（包括植入式医疗器械行业和制药行业）关注的重点。.

 

什么是细菌内毒素及其影响？

什么是细菌内毒素？

内毒素或脂多糖（LPS）是 革兰氏阴性菌外膜的片段 （革兰氏染色法显示，革兰氏阴性菌呈粉红色，革兰氏阳性菌呈紫色）。革兰氏阴性菌的例子包括大肠杆菌、沙门氏菌、军团菌、奈瑟菌等。

 

图1——革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁

 

革兰氏阴性菌 广泛存在于环境中 （水、供暖系统、消化道和粪便中……）， 因此内毒素的存在可能构成极高的风险。 内毒素分子在细胞裂解（细胞膜在物理、化学或生物因素的作用下被破坏）过程中释放。

内毒素污染会造成哪些后果？

内毒素的生物组成会影响人类和动物的免疫系统，并可能引起过敏反应。因此，它们会导致较强烈的炎症反应。它们还可能导致免疫功能低下者、婴幼儿或老年患者发生严重感染。.

最常见的反应是发烧。 这就是为什么 革兰氏阴性菌内毒素被认为是“致热原”，即通过激活免疫系统引发体温升高的分子。

吸入内毒素也可能导致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。注射后，内毒素进入体内，当大量内毒素进入血液时，可引起弥散性血管内凝血，甚至感染性休克。.

在制药行业等关键环境中，内毒素监测至关重要。这在生产药用级水（纯净水）、肠外和注射用药物（输液、透析液等）以及植入式医疗器械时尤为如此。.

 

降低洁净室手套上的内毒素水平

内毒素是已知的药品和医疗器械中最常见的致热原来源。.

内毒素是革兰氏阴性菌的膜残留物。革兰氏阴性菌在环境中数量众多且具有活性。此外， 内毒素对包括伽马射线照射在内的消毒或灭菌方法具有很强的抵抗力。

因此，在进行灭菌之前，应尽可能降低丁腈和乳胶手套的生物负荷。.

生物负荷是指物体表面或设备内部各种活微生物的浓度。生物负荷主要来源于：

• 生产过程中使用的原材料（包括药用级水）。.
• 参与制造过程的操作人员。.
• 制成品的清洗和包装作业。.

SHIELD Scientific 无菌手套上的微生物污染检测和定量由外部机构按照 ISO 11737-1 标准进行。这是 SHIELD Scientific质量控制流程的基本组成部分。.

因此，药品或植入式医疗器械生产中使用的所有原材料、包装或防护设备都必须 符合无菌和无热原的健康要求。

无菌性： 为确保无菌保证水平 (SAL) 达到 10-6（符合欧洲药典的要求），手套必须按照 ISO 11137-2:2015（医疗保健产品的灭菌——辐射——第 2 部分：确定灭菌剂量）进行微生物验证。

 

图 2 – SHIELDskin XTREME™ 无菌手套 PE 袋，带灭菌指示剂

无热原性： 去除热原的方法有很多种：

• 使用注射用水 (WFI) 或其他高级水（如去离子水）进行清洗。.
• 干热处理，即暴露于高温下进行处理。.
• 采用压力和过氧化氢相结合的湿热处理（警告：高压灭菌器不能破坏内毒素）。.
• 根据分子量对内毒素进行超滤。.
• 环氧乙烷破坏。.

 

为什么控制无菌洁净室手套上的内毒素水平很重要？

对于许多药品和植入式医疗器械制造商而言，无菌性（不含活微生物）和无致热性（不含内毒素等致热分子）至关重要。.

为了尽可能降低内毒素带来的风险， 应该在整个生产过程中控制污染，从原材料到成品，包括洁净室操作人员的防护设备。

事实上， 戴手套的手可能直接接触注射液或其容器以及植入式医疗器械。因此，手套可能成为污染源。

 

图 3 – 操作员佩戴两副 SHIELD Scientific 无菌手套更换灌装机针头

 

标准的丁腈和乳胶一次性手套在完成浸渍和干燥步骤后，仅经过极少的处理。因此，这些手套的洁净度可能达不到洁净室应用的要求。此外，值得注意的是，手套上可能沾染大量革兰氏阴性菌。即使是经过氯化处理并用纯净水清洗的无菌洁净室手套，其内毒素含量也往往无法保证。.

此外，由于颗粒物可以传播内毒素，因此选择颗粒物“保证含量低”的手套有助于加强您的污染控制策略。.

因此，选择内毒素含量低的（根据 EN 455-3:2015 的定义，每副手套内毒素含量低于 20 EU）手套，最好是选择经过批次内毒素测试的手套，这可能是一个解决方案。.

 

如何监测无菌洁净室手套的内毒素水平？

关于无菌手套内毒素污染的监管框架

欧盟 药品生产质量管理规范（GMP）附件一是规范药品生产和控制的主要文件之一。该文件提供了质量风险管理指南。特别是，新版GMP附件一明确规定，必须避免最终产品受到微生物、颗粒物和内毒素/热原污染。 因此，无菌洁净室手套的使用必须纳入质量风险管理（QRM）流程。

EN 455-3:2015 （一次性医用手套 – 第3部分：生物学评价的要求和测试） 要求无菌一次性手套生产商控制手套的内毒素污染。 测试方法应符合欧洲药典专论2.6.14的要求。

利用鲎检测内毒素

测量无菌洁净室手套上细菌内毒素水平最广泛使用和认可的方法是使用 鲎变形细胞溶解物 (LAL)。

鲎是一种古老的海洋节肢动物，它的独特之处在于拥有蓝色的血液（或者更确切地说，对于无脊椎动物而言是血淋巴）。.

 

图4 – 美洲鲎（Limulus polyphemus）

 

这种血淋巴中含有卵圆形的变形细胞，这些细胞在内毒素的作用下会失去原有形状并聚集形成血凝块。 鲎血的这种凝固现象是各种内毒素检测方法的基础。

无菌手套内毒素污染的检测方法

首先将一副手套的外表面浸入40至50毫升无内毒素水（符合欧洲药典标准的鲎试剂水）中，在37℃至40℃的温度下浸泡40至60分钟。如有必要，将提取液离心（2000 g，15分钟）以去除颗粒。然后倾析上清液，并立即进行内毒素检测。.

使用鲎变形细胞裂解液的细菌内毒素检测方法主要有3种：

• 凝胶凝块试验 （一种“定性”试验 = 可以检测内毒素的存在，但不能精确确定其数量）：将提取物和 LAL 试剂混合后形成凝胶（“凝块”）。
• 动力学浊度试验 （一种“定量”试验 = 可以检测内毒素的存在并确定其数量）：与 LAL 试剂混合后出现浊度。
• 显色试验 （一种“定量”试验 = 可以检测内毒素的存在并确定其数量）：与 LAL 试剂混合后显色。

检测结果以每副手套的内毒素单位（EU）表示。.

EN 455-3:2015 规定， 要贴上“低内毒素含量”的标签，手套的内毒素含量限制必须为每副手套 20 EU。

 

SHIELD Scientific 低内毒素含量无菌手套，适用于关键环境

为了降低患者出现某些并发症的风险，应注意使用内毒素含量低的优质无菌手套。.

作为整体污染控制和质量风险管理 (QRM) 策略的一部分 ，考虑手套的选择以及这如何应用于您的关键环境可能会有所帮助。

因此， SHIELD Scientific 开发了一系列丁腈和乳胶洁净室手套，其洁净度等级与去离子水的洗涤次数直接相关。该系列一次性手套采用简单的分类方法：

DI： 手套经去离子水单次洗涤，用于 基本污染控制 ，颗粒物含量规格为<3,000个/cm²，粒径>0.5μm。DI
+：手套经去离子水三次洗涤，用于 高污染控制 ，颗粒物含量规格为<1,200个/cm²，粒径>0.5μm。DI
++：手套经去离子水多次洗涤，用于 极致污染控制 ，颗粒物含量规格为<850个/cm²，粒径>0.5μm。

所有 SHIELDskin XTREME™ 品牌的无菌手套 均按照GMP操作人员所需的质量标准设计，以降低污染风险。 所有 SHIELD Scientific 洁净室丁腈和乳胶无菌手套均经过批次测试，证明每副手套的内毒素含量低于20 UE（内毒素单位），且无菌保证水平（SAL）为10⁻⁶（通过伽马射线辐照灭菌）。

每批 SHIELD Scientific 无菌丁腈和乳胶洁净室手套均附带一份辐照证书（CoI）。合格证书（CoC）提供特定批次的颗粒物和内毒素含量数据。.

 

由于在关键环境中控制内毒素污染至关重要，请立即 订购样品 或 咨询 SHIELD Scientific 销售代表。