使用 TRIzol® 提取 RNA 时应该佩戴哪种一次性手套?
RNA在基因表达中扮演着至关重要的角色,它是DNA和蛋白质之间的桥梁。DNA、RNA和蛋白质的提取是分子遗传学研究的关键步骤。 在RNA提取过程中,佩戴合适的个人防护装备(PPE)至关重要,以避免RNase污染,因为RNase污染可能会影响实验结果。此外,提取方法通常需要使用有机溶剂。根据所使用的提取方法, 选择合适的实验室手套 至关重要,尤其是那些能够最佳耐受所处理化学品的手套。 因此,在使用TRIzol®或类似试剂提取RNA时,务必仔细选择一次性手套。
最常用的RNA提取方法是什么?
硫氰酸胍-苯酚-氯仿提取法广泛应用于分子生物学中,用于从各种样品(人/动物组织;植物;酵母;细菌)中分离RNA(偶尔也分离DNA和蛋白质)。.
自1987年Chomczynski-Sacchi方法发表以来(来源:Chomczynski – Sacchi – 1987. “酸性硫氰酸胍-苯酚-氯仿提取法单步提取RNA” https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2440339/ ),该方法已成为参考标准。尽管如今存在许多替代方法,例如提取试剂盒,但许多用户仍然偏爱这种手动提取方法。
多家公司以各种商业名称销售用于此提取过程的试剂,例如 TRIzol®(Invitrogen)、TRI Reagent®(Molecular Research Center)、QIAzol®(Qiagen)、NucleoZOL(Macherey-Nagel)、RNA Extracol(Eurx)等。.
硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取法能够同时溶解蛋白质、脂质和核酸,并保持RNA的完整性。该方法的主要优势在于,只需调整萃取阶段,即可从同一份样品中同时分离RNA、DNA和蛋白质。 然而,该方法的主要挑战在于如何处理过程中涉及的有毒且易挥发的试剂。
RNA提取所用试剂有哪些危害?
在本文中,我们特指“TRIzol®”——我们在实验室手套的耐化学性测试(化学渗透)中使用的商业溶液。.
所有这些试剂均由苯酚(溶剂)和硫氰酸胍(变性剂)的混合物组成。.
根据关于物质和混合物的“分类、标签和包装”(CLP法规)的第1272/2008号法规,这些试剂带有各种危险警告和符号:
这些试剂的组成包括:
- 苯酚:一种对皮肤和眼睛具有强腐蚀性的化合物,吸入、摄入和皮肤接触均有毒。它会导致严重的灼伤和损伤。
- 硫氰酸胍:对皮肤和眼睛有腐蚀性,吸入、摄入和皮肤接触均有毒,并可引起刺激和灼伤。
在通风橱内处理这些试剂以避免接触有毒蒸汽时,使用者会面临 化学风险,尤其是通过皮肤接触。
实验室操作人员通常需要处理商业包装(100-200毫升),在此过程中存在 意外泄漏的风险。 在样品处理阶段,操作人员还会接触到TRIzol® (微量移液、涡旋振荡样品、打开/关闭微量离心管、研磨样品等)。
务必确保使用合适的个人防护装备(PPE),例如 实验室 在处理这些化学品时,.
哪些一次性手套适合用于处理RNA提取试剂?
鉴于所涉及的化学品,佩戴合适的医用一次性手套至关重要。操作人员应评估他们通常用于此类操作的手套是否适合处理这些试剂。.
应优先选择一次性丁腈或丁腈/氯丁橡胶手套,而非天然橡胶乳胶手套。 丁腈手套确实更耐有机溶剂。
SHIELDskin SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™、 SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 和 SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300以及 ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 手套特别适合在处理 RNA 提取试剂时防止飞溅。
结果 使用 TRIzol® 对这些手套进行化学渗透测试, 如下:
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250:93 分钟
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300:100 分钟
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300:>480分钟
对于分子生物学实验室, 我们推荐 ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 手套,它似乎在防护性和成本之间取得了最佳平衡。
SHIELDskin SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™、 SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260和 ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 手套均采用 twinSHIELD™ 技术。这种双层浸渍工艺打造出双层手套。得益于 twinSHIELD™ 技术,这些手套的 AQL 值达到 0.25,是目前市场上防护等级最高的手套,能够 更好地保障操作人员的安全。 如需 了解更多关于实验室手套 AQL 值重要性的信息 ,请花几分钟时间阅读我们的专题文章。
在进行 RNA 提取时,切勿冒险——请佩戴适合处理试剂的手套。请参阅我们的 手套选择指南 和 耐化学性指南 ,或 联系您的 SHIELD Scientific 销售代表, 以便做出明智的选择。
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