Quels gants à usage unique porter lors de l'extraction d'ARN avec TRIzol® ?
L'ARN joue un rôle crucial dans l'expression des gènes, servant d'intermédiaire entre l'ADN et les protéines. L'extraction de l'ADN, de l'ARN et des protéines est une étape clé dans l'étude de la génétique moléculaire. Le port d'un équipement de protection individuelle (EPI) approprié lors de l'extraction de l'ARN est essentiel pour éviter toute contamination par la RNase , qui pourrait fausser les résultats. De plus, les méthodes d’extraction nécessitent souvent l’utilisation de solvants organiques. Selon la méthode d'extraction utilisée, le choix des gants de laboratoire adaptés est essentiel, notamment ceux qui offrent la meilleure résistance aux produits chimiques manipulés. C'est pourquoi il est si important de sélectionner soigneusement les gants à usage unique que vous portez lors de l'extraction d'ARN avec TRIzol® ou des réactifs similaires.
Quelle est la méthode d’extraction d’ARN la plus utilisée ?
La méthode d'extraction au thiocyanate de guanidinium-phénol-chloroforme est largement utilisée en biologie moléculaire pour isoler l'ARN (et occasionnellement l'ADN et les protéines) de divers échantillons (tissus humains/animaux ; plantes ; levures ; bactéries).
Depuis la publication de la méthode Chomczynski-Sacchi de 1987 ( Source : Chomczynski – Sacchi – 1987. « Méthode en une seule étape d’isolement de l’ARN par extraction acide de thiocyanate de guanidinium-phénol-chloroforme. » https://pubmed.ncbi.nlm.nih. gov/2440339/ ), elle est devenue la méthode de référence. Bien que de nombreuses méthodes alternatives existent aujourd’hui, comme les kits d’extraction, de nombreux utilisateurs préfèrent encore cette méthode manuelle.
Plusieurs sociétés commercialisent des réactifs pour ce processus d'extraction sous différents noms commerciaux, tels que TRIzol® (Invitrogen), TRI Reagent® (Molecular Research Center), QIAzol® (Qiagen), NucleoZOL (Macherey-Nagel), RNA Extracol (Eurx) et autres.
Le protocole d’extraction au thiocyanate de guanidinium-phénol-chloroforme permet la dissolution simultanée des protéines, des lipides et des acides nucléiques tout en maintenant l’intégrité de l’ARN. Le principal avantage de cette méthode est sa capacité à isoler simultanément l’ARN, l’ADN et les protéines du même échantillon en ajustant simplement la phase de récupération. Cependant, le principal défi réside dans la manipulation des réactifs toxiques et volatils impliqués dans le processus.
Quels sont les dangers des réactifs utilisés pour l’extraction de l’ARN ?
Dans cet article, nous faisons spécifiquement référence au « TRIzol® » — la solution commerciale utilisée dans nos tests de résistance chimique sur gants de laboratoire (perméation chimique).
Tous ces réactifs sont constitués d'un mélange de phénol (solvant) et de thiocyanate de guanidinium (agent chaotropique).
Ces réactifs portent divers avertissements et symboles de danger conformément au règlement (CE) n° 1272/2008 relatif à la « classification, à l'étiquetage et à l'emballage » (règlement CLP) des substances et mélanges :
La composition de ces réactifs comprend :
- Phénol : Composé hautement corrosif pour la peau et les yeux, toxique par inhalation, ingestion et contact cutané. Cela peut provoquer de graves brûlures et blessures.
- Thiocyanate de guanidinium : Corrosif pour la peau et les yeux, toxique par inhalation, ingestion et contact cutané, et peut provoquer des irritations et des brûlures.
Lors de la manipulation de ces réactifs sous sorbonne pour éviter toute exposition à des vapeurs toxiques, les utilisateurs s'exposent à des risques chimiques , notamment par contact cutané.
Les opérateurs de laboratoire manipulent généralement les emballages commerciaux (100 à 200 ml), au cours desquels il existe un risque de déversement accidentel . Lors de la phase de traitement des échantillons, les opérateurs sont également exposés au TRIzol® (micropipetage, vortex des échantillons, ouverture/fermeture des microtubes, broyage des échantillons, etc.).
Il est donc crucial de garantir l’utilisation d’équipements de protection individuelle (EPI) appropriés, tels que de laboratoire , lors de la manipulation de ces produits chimiques..
Quels gants jetables conviennent à la manipulation des réactifs d’extraction d’ARN ?
Compte tenu des produits chimiques impliqués, le port de gants jetables adaptés est de la plus haute importance. Les opérateurs doivent évaluer si les gants qu'ils portent habituellement pour ces tâches sont adaptés à la manipulation de ces réactifs.
La priorité doit être donnée aux gants à usage unique en nitrile ou en nitrile/néoprène plutôt qu'aux gants en latex de caoutchouc naturel. Les gants en nitrile sont en effet plus résistants aux solvants organiques.
Les SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ , SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 et SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 300 et ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 sont particulièrement adaptés à la protection contre les éclaboussures lors de la manipulation de réactifs d'extraction d'ARN.
Les tests de perméation chimique avec TRIzol® sur ces gants ont donné les résultats suivants :
- ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF 250: 93 minutes
- SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260260/300 : 100 minutes
- SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™ 300: >480 minutes
Pour une utilisation dans les laboratoires de biologie moléculaire, nous recommandons le ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250, qui semble offrir le meilleur équilibre entre protection et coût.
Les SHIELDskin CHEM™ NEO NITRILE™, SHIELDskin™ ORANGE NITRILE™ 260 260/300 et ecoSHIELD™ Eco Nitrile PF250 sont tous fabriqués à l'aide de la technologie twinSHIELD™ . Cette technique de double trempage crée un gant double couche. Grâce à twinSHIELD™ , ces gants atteignent un AQL de 0,25 , le plus haut niveau de protection du marché, offrant une meilleure sécurité de l'opérateur. Pour en savoir plus sur l’importance du NQA des gants de laboratoire, prenez quelques minutes pour lire notre article dédié.
Ne prenez aucun risque lors de vos extractions d’ARN : portez des gants adaptés à la manipulation des réactifs. Consultez notre guide de sélection de gants et notre guide de résistance chimique ou contactez votre représentant commercial SHIELD Scientific pour faire un choix éclairé.
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